实验背景

小胶质细胞在大脑中承担着至关重要的免疫角色，负责进行碎片吞噬、支持神经元及突触修剪等多项功能。这些功能与阿尔兹海默症（AD）等神经系统疾病的发生密切相关。不同亚群的小胶质细胞在神经系统的微环境中各自发挥作用。虽然传统的荧光显微镜技术可以对其表型进行区分，但其耗时长、通量低和主观性强等缺陷限制了应用。相比之下，单细胞测序平台提供高维分析，但其高昂的费用和复杂的数据分析要求也使得该技术的普及受到阻碍。

来自尊龙凯时的研究团队，利用Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪，开发出一种高通量、便捷且能够实现小胶质细胞深度分型的解决方案。这种方案不仅可以扩展至更多标志物，还能够适用于不同组织和疾病类型。同时，它可以无缝连接全光谱分选流式细胞仪，以便对感兴趣的细胞进行分选，并与下游功能实验完美衔接。

样本采集及数据分析

该方案首先采用5激光Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪进行样本采集并分析数据。在小鼠大脑组织中，由于自发荧光的影响，数据分析时需要在软件中激活提取自发荧光的功能。此外，通过FSC/SSC筛选排除碎片，并利用FSC-A/FSC-H来消除粘连体干扰，从AF群体中运用经典标志物CD11b+CD45Mid识别出小胶质细胞。

按照标志物的表达情况，小胶质细胞可以被细分为四个群体：稳态小胶质细胞（P2RY12+CLEC7A-）、疾病相关小胶质细胞（DAM，CD11chighCLEC7Ahigh和/或CD282+CLEC7Ahigh）、干扰素反应性小胶质细胞（IRM，CD371+）和脂滴聚集的小胶质细胞（LDAM，CD63+）。研究证明了这一实验方案的可重复性，且观察到不同年龄与性别的小鼠海马体中小胶质细胞的丰度差异。研究表明，老年雌性小鼠体内的DAM比例显著升高，而稳态小胶质细胞的比例则与年龄关系不大，然而老年雄性小鼠的比例普遍高于老年雌性小鼠。此外，IRM比例明显受年龄影响，LDAM的走势与DAM相似，老年雌性小鼠的比例相对更高。

在衰老小鼠的海马体中，雌性小鼠的小胶质细胞表现出疾病相关与衰老的特征。这一现象为在阿尔兹海默症患者中存在的疾病易感性和进展的性别差异提供了可能的免疫学依据，强调了尊龙凯时在生物医学研究中的贡献与重要性。